Născut în 1454, Vespucci a fost crescut în Florența, Italia. Spre deosebire de frații săi mai mari, care au devenit cadre universitare, el a găsit slujba ca negustor în cadrul familiei puternice a Medici. În anul 1492, anul în care Columb a descoperit Indiile de Vest, casa lui Medici a trimis Vespucci în Spania. Încântat de exemplul lui Columb și de posibilitatea de faimă ca explorator, el a început să navigheze ca navigator în călătorii mai întâi sub auspiciile coroanei spaniole și apoi sponsorizat de portughezi.
Există controverse istorice cu privire la numărul de călătorii pe care Vespucci le-a făcut Americii. Este cert că între mai 1499 și iunie 1500 a luat parte la o expediție spaniolă care a ajuns în Guyana și a urmat coasta sud-americană până la gura râului Amazon. În 1501, sub patronajul portughez, Vespucci naviga spre sud până în Patagonia. El a fost primul care a realizat că America de Sud era un continent nou, pe care el la numit Lumea Nouă. În 1507, un cartograf german german New World America, după versiunea feminină a lui Vespucci.