Iroquoisii au crezut în zeități multiple, cel mai important fiind creatorul ființelor umane, plantelor, animalelor și bunului din lume, cunoscut sub numele de Marele Duh. Deși nu credeau că oamenii ar putea comunica direct cu aceste spirite, ei au crezut că era posibil prin arderea tutunului. Iroquoisii au avut mare respect față de visele lor și au interpretat și au căutat semne în ele. Ei nu aveau preoți sau șamani cu normă întreagă, ci au desemnat specialiști de sex masculin și de sex feminin pentru a purta ceremonii religioase. Iroquois a creat "Mască falsă", care erau chipuri sculptate în copaci în picioare, apoi tăiați, decorați și purtați ulterior. Aceste măști au reprezentat spiritele care au apărut sculptorului în ceremonia de tutun efectuată în prealabil.
Bărbații din trib au vânat și au pescuit, au construit case, au curățat câmpuri de plantare, au făcut comerț cu străini și au luat parte la orice război. Femeile care au crescut, au crescut copii, au pregătit mese și au făcut coșuri și alte unelte.
Multe părți ale culturii Iroquois au implicat aspecte matrilineare. Deși oamenii s-au căsătorit și au divorțat, iar bărbații au adesea soții multiple, la divorț, copiii au rămas cu mama. Moștenirea a urmat, de asemenea, acest model, cu proprietatea către femei.
Iroquois nu a practicat nici un ritual cunoscut de formalitate, de altfel decât pentru cei care au luat o poziție politică.
