Mambele negre mănâncă mamifere mici, găsite în gama lor africană, inclusiv rozătoarele precum veverițele și altele, cum ar fi hiraxurile, împreună cu păsările ocazionale. Își ucid prada cu venin, lovind de două ori și injectând un neurotoxin , și ei nu mănâncă până când pradă lor nu sunt paralizați sau morți.
Mambasii negri adesea se adăpostesc în structurile umane și sunt imprevizibili și agresivi în comportamentul lor. Venomul de mambas negru este infamat pentru pericolul pe care îl are omul, iar un om lovit de un mamba neagră poate muri cât mai repede cu 20 de minute mai târziu. Dacă este mușită, este necesară asistență medicală imediată și poate fi necesară o susținere de viață până când sistemul imunitar se recuperează.
