Spațiul periplasmic este zona găsită între două limite permeabile. Spațiul periplasmic se găsește în bacteriile Gram-negative, între membranele interioare și cele exterioare, conform lui UniProt. În bacteriile Gram-pozitive, spațiul periplasmic este mai mic și se găsește între carcasa exterioară a polimerului și membrana interioară.
Periplasmul conține proteine și apă și poate fi comparat cu citoplasma. Cu toate acestea, moleculele mici prezente în periplasm sunt diferite de citoplasmă, deoarece membranele împiedică schimburile libere să se întâmple între cele două compartimente. Proteinele prezente în periplasm sunt foarte diferite de citoplasmă și sunt ghidate în timpul traducerii prin semnale specifice. Enzimele periplasmice joacă roluri în motilitate, degradarea altor compuși și transport.