Zaharurile nu produc rezultate pozitive într-un test de fermentație. Fermentația este procesul în care zaharurile sunt transformate într-un alt produs chimic. Într-un test de fermentație, zaharurile specifice sunt utilizate pentru a determina prezența bacteriilor. Un rezultat pozitiv ar fi formarea de acid, gaz sau alcool.
Zaharurile folosite în cadrul unui test de fermentație sunt selectate în mod specific pe baza produselor pe care acestea le produc și a celor care duc la acest rezultat. De exemplu, agarul de sare de manitol ucide majoritatea bacteriilor, cu excepția bacteriilor Staphylococcus rezistente la sare. Numai anumite tulpini de Staphylococcus reacționează cu manitolul din agar, cum ar fi Staphylococcus aureus, care produce subproduse acide. Mancatul de sare agar are un indicator de pH roșu care se transformă în galben în prezența unor niveluri mai ridicate de aciditate pentru a indica această reacție.
Testele de fermentare se efectuează în medii diferite, în funcție de rezultatul dorit și de bacteriile testate. Cele două medii cele mai comune sunt supă și agar. Agar este un compus asemănător unui jeleu produs din alge care permite majoritatea bacteriilor să crească pe suprafața sa și poate fi infuzată cu diferite substanțe nutritive și substanțe chimice. Un bulion este compus din soluții de substanțe chimice. Mediile care restricționează anumite tipuri de creștere sunt denumite selective. Mijloacele care arată o schimbare fizică și care sunt folosite pentru a testa anumite produse sunt numite diferențiale. Aceste medii diferențiale sunt baza multor teste de confirmare, inclusiv teste de fermentare.