În plus față de importanța sa în pubertate, testosteronul joacă, de asemenea, un rol vital în primele etape ale dezvoltării masculine în cadrul fătului. În timpul pubertății, creșterea nivelului de modificări ale declanșării testosteronului, cum ar fi creșterea creșterii părului facial, aprofundarea vocii și creșterea spontană a bărbaților. De-a lungul vieții unui om, testosteronul acționează pentru a conduce producția de spermatozoizi.
Testosteronul este eliberat din testicule de celulele Leydig care se află între structurile numite tubuli seminiferoase.