O soluție simplă de ninhidrină poate fi făcută prin punerea a 25 de grame de cristale de ninhidrină într-un galon de solvent. Acetona, care poate fi obținută din orice magazin de vopsele, este cea mai ușoară de obținut. Ninhidrina degradează aminoacizii în amoniac, aldehide și CO2 prin seria de reacții. Acest lucru lasă ninhidrina într-o formă parțial redusă de hidrindantină. Ninhidrina se condensează apoi cu amoniacul și hidrindantina, creând pigmentul albastru, numit purpuriu al lui Ruhemann.
Fiecare acid dă o ușoară variație culorii și, așa cum s-a menționat mai sus, hidroxiprolina și prolină produc o soluție galbenă. Deoarece culoarea poate fi produsă cu amoniac și hidrindantină singure, sărurile de amoniu și anumite amine pot produce fals pozitive cu acest test. Pe lângă amprentele digitale, acest test este adesea folosit în etanol pentru a dezvolta aminoacizi în cromatografia pe hârtie.
