O diafragmă pe un microscop este piesa care permite utilizatorului să ajusteze cantitatea de lumină care este focalizată sub specimenul observat. O diafragmă se găsește de obicei pe microscoape cu o putere mai mare comparativ cu cele mai puțin costisitoare sau modele de jucării.
Diafragma este situată direct sub scena sau pe platforma în care utilizatorul plasează specimenul sau diapozitivul. Discul de diafragmă, denumit uneori iris, are găuri mici care permit o varietate de grade de lumină sub specimen. Prin deschiderea diafragmei, un element care la început pare prea întunecat este mai ușor de observat. Ajustarea diafragmei poate crea, de asemenea, contrast pentru o mai bună vizualizare a eșantioanelor transparente.