La prepararea bacteriilor pentru observarea cu microscop, fixarea cu căldură a frotiului de pe diapozitiv ucide bacteriile pentru a opri răspândirea potențială a bolii și aderă la frotiu la diapozitiv. După fixarea cu căldură, frotiu este colorat.
Potrivit departamentului de microbiologie de la Universitatea din Wisconsin-Madison, pregătirea frotiurilor începe cu o probă de bacterii amestecată cu puțină apă distilată. Proba este împrăștiată subțire pe diapozitiv și lăsată să se usuce la aer. Apoi, diapozitivul este fixat la căldură prin trecerea de jos a flacării unui arzător Bunsen de câteva ori. După o fixare corespunzătoare a căldurii, diapozitivul se simte cald, dar nu prea fierbinte. Când gheața s-a răcit, pata este aplicată.
