Enzima ADN polimerazei III este enzima primară implicată în replicarea ADN-ului bacterian. Efectuează funcția polimerazei 5'-3 ', ceea ce înseamnă că adaugă nucleotide la capătul 3' Secvență ADN în timpul replicării.
Înainte de începerea replicării, enzima helicază desface cele două fire ADN. Ambele fire devin șabloane pentru replicare. ADN polimeraza III nu poate adăuga nucleotide libere la aceste catene până când primii nu au fost adăugați de enzima primază. Există, de asemenea, o ADN polimerază I care corectează lanțurile ADN nou sintetizate pentru a se asigura că au fost adăugate nucleotidele corespunzătoare. Repară greșelile atunci când sunt găsite prin eliminarea nucleotidelor proaste și adăugarea celor corecte.