Un spectrofotometru este utilizat pentru măsurarea intensității luminii sau a cantității de fotoni absorbite de un obiect de probă sau cu cantitatea de fotoni reflectată de un obiect eșantion. Instrumentul este alcătuit dintr-un spectrometru pentru producerea luminii și a unui fotometru pentru măsurarea intensității luminii.
Un spectrofotometru trece printr-un obiect de probă un fascicul de lumină și măsoară intensitatea luminii care ajunge la detector. Un spectrofotometru poate fi clasificat fie ca un spectrofotometru IR, fie ca un spectrofotometru vizibil UV, în funcție de gama de lungimi de undă ale sursei de lumină.
Principiul de bază al spectrofotometriei este acela că fiecare compus transmite sau absoarbe lumina peste o anumită lungime de undă. Spectrofotometria este o metodă utilă de analiză cantitativă în domenii precum biochimia, fizica și chimia.