Enzima helicază puternică a ADN-ului enzimatic decoltează dublurile de ADN prin ruperea legăturilor dintre fiecare dintre bazele complementare. Aceste baze sunt ținute împreună prin legături puternice de hidrogen, dar prin ruperea acestora, helicaza ADN creează două molecule de ADN monocatenare.
Helicaza ADN se atașează la molecula ADN la ceea ce se numește originea replicării pentru a începe procesul de replicare a ADN-ului. Helicaza acționează ca un fel de pană care "dezabonează" molecula de ADN dublu catenar într-o furculiță în formă de Y, cunoscută sub numele de furculița de replicare. Până când helicaza a ajuns la capătul firului ADN, mișcând furculița de replicare de-a lungul drumului, există două fire simple de ADN și replicarea este în curs.