În timpul unei pete Gram, pata de cristal violet este aplicată la proba de bacterii pentru a determina dacă este pozitivă sau negativă. Se aplică un agent de decolorare, de obicei alcool sau acetonă, și aceasta strânge stratul peptidoglican. Într-o bacterie Gram-negativă, membrana exterioară este degradată prin acest procedeu, iar stratul subțire de peptidoglican nu poate reține colorantul violet cristal. După aplicarea safraninei contraceptive, celulele gram-negative apar roșii, potrivit Centrului de Resurse pentru Educația Științifică a Colegiului Carleton.
Multe tipuri de bacili gram-negativi sunt dăunători oamenilor. Enterobacteriaceae este o familie de bacili gram-negativi, care conține peste 14 genuri de bacterii care au fost găsite a provoca infecții la om. Cel mai important dintre acestea este Escherichia coli, care cauzează majoritatea infecțiilor tractului urinar și este, de asemenea, un factor în perturbarea polimicrobiană a tractului gastro-intestinal. Alte genuri semnificative sunt Salmonella, care cauzează gastroenterită, Salmonella typhi, care cauzează febră enterică, și Shigella, o cauză comună a dizenteriei, notează infecțiaNet.