Lionii, ca și alte mamifere, urinează prin organele genitale, printr-un tub care duce de la vezica lor la lumea exterioară. Sistemul urinar al leilor este similar cu alte pisici, prin folosirea urinei atât pentru a elimina deșeurile, cât și pentru a comunica prin marcare prin pulverizare.
Toate mamiferele au aceeași anatomie de bază pentru urinare. Rinichii filtrează deșeurile din sânge printr-un sistem complex de tubuli. Un tub numit ureterul transportă apoi lichidul care a fost procesat de rinichi în vezică, unde este stocată.
La leii și tigrii, urina stocată în vezică conține și substanțe grase odorabile care ajută la marcarea teritoriului. Toate speciile de pisici se angajează în marcarea prin pulverizare, un fel de urinare în care lichidul este pulverizat în exterior pentru a pretinde teritoriul cu indicii de miros. Bărbații se angajează mai mult decât femelele în marcarea spray-urilor, dar ambele sunt cunoscute pentru a face acest lucru la atingerea vârstei de 2 ani.
Ca și în cazul altor mamifere, urină de leu trece din vezică către exterior prin uretra, un tub care trece prin vulvă sau penis.