Multe bacili gram-pozitivi au cauzat numeroase boli din întreaga lume. Mycobacterium tuberculosis provoacă tulburări pulmonare severe și este transmis prin aer prin strănut sau tuse. Listeria monocytogenes este o specie bacteriană facultativă care provoacă listerioză, una dintre cauzele principale ale meningitei și meningoencefalitei. Infecția cu Mycobacterium leprae la oameni are ca rezultat boala lui Hansen, mai cunoscută sub numele de lepră. Bacillus anthracis este principalul agent al antraxului, boala fatală a fost considerată o amenințare la adresa bioterorismului în 2001, când sporii bacterieni au fost livrați în corespondență.
În schimb, unele bacili gram-pozitivi sunt sigure pentru oameni și sunt chiar infuzați în alimente. Bacillus subtilis este o bacterie care formează spori utilizat în fabricarea hranei japoneze natto și este, de asemenea, utilizată în antibiotice pentru tratarea infecțiilor tractului urinar.Colorarea Gram este o metodă de diferențiere bacteriană care categorizează diferite specii de bacterii în funcție de răspunsul lor la o pată violetă. Această procedură se bazează pe absorbția unui colorant de violet cristal de către stratul peptidoglican al bacteriei, un strat prezent numai în bacteriile Gram-pozitive.